用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)物中兔出血癥病毒

用本所實(shí)驗(yàn)室制備的兔出血癥病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)高免血清,按常規(guī)方法提純出抗體(IgG),用異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記IgG.在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)瓶中放入玻片,當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)成單層時(shí),按常規(guī)方法接種病毒液,培養(yǎng)24、48、96、120h時(shí)取出玻片,用熒光抗體染色,在熒光顯微鏡下觀察不同代次的細(xì)胞毒.經(jīng)觀察:兔腎上皮細(xì)胞(RK)毒培養(yǎng)到36～48h、羊睪丸細(xì)胞(ST)毒培養(yǎng)到72～96h時(shí)可觀察到特異性熒光,隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng).熒光亮度增強(qiáng),胞漿內(nèi)充滿特異性熒光.用肝組織強(qiáng)毒病料觸片,呈特異性熒光,對(duì)照細(xì)胞培養(yǎng)48h無(wú)熒光出現(xiàn),證實(shí)了兩株細(xì)胞培養(yǎng)物中有大量的兔出血癥病毒存在,從而成功的分離培養(yǎng)出了兔出血癥病毒細(xì)胞毒.

作 者： 薛掌林 張述斌 康文彪 XUE Zhang-lin ZHANG Shu-bin KANG Wen-biao   作者單位： 甘肅省畜牧獸醫(yī)研究所,平?jīng)?744000  刊 名： 中國(guó)養(yǎng)兔  英文刊名： CHINESE JOURNAL OF RABBIT FARMING  年，卷(期)： 2009 ""(1)  分類號(hào)： S858.291  關(guān)鍵詞： 免疫熒光技術(shù)   羊睪丸細(xì)胞   兔腎上皮細(xì)胞   兔出血癥病毒  

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