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人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)及鑒定
目的:體外分離、培養(yǎng)、鑒定人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hBMSC).方法:利用密度梯度離心法分離出人骨髓單個(gè)核細(xì)胞(MNC),通過貼壁篩選法建立hBMSC的體外培養(yǎng)體系,并通過一系列檢測(cè)方法對(duì)所培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行鑒定.結(jié)果:細(xì)胞主要呈"成纖維樣",但體積較大、形狀不規(guī)則、細(xì)胞質(zhì)突起多,細(xì)胞核大而疏松,核仁明顯.流式細(xì)胞儀檢測(cè):CD34陽性率為2.09%、CD29陽性率為94.46%;CD54及CD105表達(dá)陽性.細(xì)胞周期及透射電鏡檢測(cè)提示細(xì)胞處于相對(duì)原始狀態(tài).免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示:CD14、CD45、膠原蛋白Ⅱ呈陰性;CD106、CD166、纖維連接蛋白、波形蛋白及膠原纖維酸性蛋白呈陽性.細(xì)胞化學(xué)染色:糖原染色呈強(qiáng)陽性;堿性磷酸酶染色呈陰性.通過誘導(dǎo)分化培養(yǎng)可誘導(dǎo)出成骨細(xì)胞.結(jié)論:成功建立了穩(wěn)定的hBMSC體外培養(yǎng)體系,按照此培養(yǎng)體系進(jìn)行培養(yǎng)可獲得hBMSC.hBMSC可傳代培養(yǎng),但在培養(yǎng)過程中細(xì)胞逐漸出現(xiàn)老化現(xiàn)象,且不能凍存.
作 者： 梁雪 粟永萍 孔佩艷 陳幸華 彭賢貴 徐輝 曾東風(fēng) 艾國(guó)平 LIANG Xue SU Yong-ping KONG Pei-yan CHEN Xing-hua PENG Xian-gui XU Hui ZENG Dong-feng AI Guo-ping 作者單位： 梁雪,孔佩艷,陳幸華,彭賢貴,曾東風(fēng),LIANG Xue,KONG Pei-yan,CHEN Xing-hua,PENG Xian-gui,ZENG Dong-feng(第三軍醫(yī)大學(xué)附屬新橋醫(yī)院血液科,重慶,400037)粟永萍,徐輝,艾國(guó)平,SU Yong-ping,XU Hui,AI Guo-ping(預(yù)防醫(yī)學(xué)院解放軍復(fù)合傷研究所創(chuàng)傷、燒傷與復(fù)合傷國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,重慶,400038)
刊 名： 醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào) ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATES 年，卷(期)： 2007 20(5) 分類號(hào)： Q813.11 關(guān)鍵詞： 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 造血微環(huán)境 細(xì)胞培養(yǎng)【人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)及鑒定】相關(guān)文章：
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