外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞體外培養(yǎng)分化研究

目的從人外周血中分離、培養(yǎng)和鑒定內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs),并觀察其在體外增殖分化過(guò)程中各種細(xì)胞表型的變化.方法采用密度梯度離心方法獲得外周血單個(gè)核細(xì)胞,體外進(jìn)行誘導(dǎo)、分化和擴(kuò)增,于培養(yǎng)第7天選擇免疫熒光(DiI-acLDL/ FITC-UEA-Ⅰ)鑒定EPCs,并且用流式細(xì)胞儀和RT-PCR方法觀察上述細(xì)胞在第0、4、10和21天的CD34、CD31、KDR和eNOS的表達(dá)變化.結(jié)果外周血單個(gè)核細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中出現(xiàn)梭形貼壁和鋪路石樣等形態(tài);第7天免疫熒光染色表明,約70%的細(xì)胞呈雙熒光陽(yáng)性;流式細(xì)胞儀分析顯示,CD31和KDR表達(dá)在體外培養(yǎng)過(guò)程中逐漸升高,至第21天分別達(dá)到(72.1±11.2)%和(81.0±12.5)%,而CD34在第10天達(dá)到高峰(38.0±13.4)%后,第21天下降為(28.3%±12.2)%;RT-PCR結(jié)果表明,第4、10和21天eNOS的表達(dá)逐漸增強(qiáng).結(jié)論本試驗(yàn)成功從外周血單個(gè)核細(xì)胞中分離培養(yǎng)出EPCs,在其體外擴(kuò)增分化為成熟內(nèi)皮細(xì)胞的過(guò)程中,CD31、KDR和eNOS等內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志表達(dá)逐漸增強(qiáng),而CD34的表達(dá)在內(nèi)皮祖細(xì)胞的成熟分化過(guò)程中略有下降.

作 者： 顧俊 王長(zhǎng)謙 范華驊 聶曉絢 何奔 王彬堯 黃定九 GU Jun WANG Chang-qian FAN Hua-hua Nie Xiao-xuan HE Ben WANG Bin-yao Huang Ding-jiu   作者單位： 顧俊,王長(zhǎng)謙,何奔,王彬堯,黃定九,GU Jun,WANG Chang-qian,HE Ben,WANG Bin-yao,Huang Ding-jiu(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院仁濟(jì)醫(yī)院心內(nèi)科,上海,200001)

范華驊,聶曉絢,FAN Hua-hua,Nie Xiao-xuan(上海血液中心血液工程研究室) 

刊 名： 上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)  年，卷(期)： 2006 26(3)  分類(lèi)號(hào)： Q813.1 Q254  關(guān)鍵詞： 內(nèi)皮祖細(xì)胞   內(nèi)皮細(xì)胞   血管新生  

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