乳糖誘導(dǎo)大腸桿菌中重組谷氨酰胺合成酶的表達

以重組枯草芽孢桿菌谷氨酰胺合成酶(L-谷氨酸:氨連接酶,Glutamine Synthetase,GS EC 6.3.1.2)蛋白表達宿主菌株BL21(DE3) (pET3C/谷氨酰胺合成酶)作為研究對象,借助SDS-PAGE分析方法,對于用乳糖誘導(dǎo)由T7lac啟動子控制的重組目的產(chǎn)物蛋白的表達規(guī)律進行了優(yōu)化研究,分別比較了最佳誘導(dǎo)起始生長量、所需乳糖的濃度、誘導(dǎo)持續(xù)時間、補加乳糖和氨芐青霉素及不同培養(yǎng)基等參數(shù)對重組產(chǎn)物表達的影響.實驗結(jié)果表明,對于T7lac啟動子控制的重組目的產(chǎn)物,乳糖作為誘導(dǎo)劑也可以起到很好的誘導(dǎo)表達效果,誘導(dǎo)產(chǎn)物的表達量、可溶性及酶活與IPTG誘導(dǎo)產(chǎn)物基本接近.本研究結(jié)果為乳糖作為誘導(dǎo)劑應(yīng)用于重組大腸桿菌谷氨酰胺合成酶工業(yè)化生產(chǎn)提供了一定的參考依據(jù).

作 者： 劉俊紅 劉順誼 殷志敏 Liu Junhong Liu Shunyi Yin Zhimin   作者單位： 劉俊紅,Liu Junhong(安徽師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,安徽,蕪湖,241000;南京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,江蘇,南京,210097)

劉順誼,殷志敏,Liu Shunyi,Yin Zhimin(南京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,江蘇,南京,210097) 

刊 名： 南京師大學(xué)報（自然科學(xué)版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 29(3)  分類號： Q78  關(guān)鍵詞： 谷氨酰胺合成酶   原核表達   乳糖   IPTG  

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