澤瀉ISSR反應(yīng)體系的建立與優(yōu)化

以四川澤瀉為實驗試材,采用改進(jìn)的CTAB法提取了澤瀉的高質(zhì)量總DNA模板,克服了澤瀉中所富含的酚類物質(zhì)的影響.對澤瀉ISSR反應(yīng)體系中各個主要影響因子進(jìn)行了優(yōu)化和篩選,建立了標(biāo)記位點清晰、穩(wěn)定、重復(fù)性好、可用于澤瀉ISSR-PCR分析的最適反應(yīng)體系,它們是:25 μL PCR反應(yīng)體系中,10×Taq酶配套緩沖液,1U Taq DNA聚合酶,1.8～2.0 mmol/L MgCl2,100 μmol/L dNTP,0.3 μmol/L引物, DNA模板約10～20 ng,退火溫度在52～60℃;為進(jìn)一步研究澤瀉居群的ISSR分子標(biāo)記鑒別奠定了基礎(chǔ).

作 者： 賀佳 丁小余 褚必海 劉冬揚 丁鴿 He Jia Ding Xiaoyu Chu Bihai Liu Dongyang Ding Ge   作者單位： 南京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,江蘇,南京,210097  刊 名： 南京師大學(xué)報（自然科學(xué)版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 29(3)  分類號： Q946  關(guān)鍵詞： 澤瀉   ISSR反應(yīng)體系   建立與優(yōu)化  

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