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甲醇利用菌SDM11中g(shù)lyA基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達(dá)
摘要： 對(duì)甲醇降解菌Methylobacterium.sp SDM11中的glyA基因進(jìn)行克隆及特性研究,以獲得更多的絲氨酸羥甲基轉(zhuǎn)移酶(serine hydroxymethyltransferase,SHMT)資源.根據(jù)GenBank中已報(bào)道的Methylobacterium extorquens AM1 中的glyA基因序列(登錄號(hào):L33463)設(shè)計(jì)引物,以SDM11的基因組DNA為模板,PCR擴(kuò)增glyA基因.利用pETblue-2載體將該基因在大腸桿菌BL21(DE3)中得到表達(dá).PCR擴(kuò)增到一個(gè)1.40 kb大小的DNA片段,經(jīng)過blast軟件比對(duì)分析,發(fā)現(xiàn)該片段與已報(bào)道的Methylobacterium extorquens AM1的glyA基因的序列相似性為95%,氨基酸序列的相似性為98%.該基因編碼468個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)的分子量大小為52.2 kD,等電點(diǎn)為7.02,發(fā)現(xiàn)純化后的目標(biāo)蛋白具有SHMT酶活性,并初步測(cè)定了酶活力. 作 者： 孔慶勝 張向陽(yáng) 韓曉琳 林強(qiáng) 董全林 作者單位： 孔慶勝,張向陽(yáng),韓曉琳(濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院,日照,276826)林強(qiáng),董全林(華中科技大學(xué),武漢,430071)
期 刊： 生物技術(shù)通報(bào) PKU Journal： BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年，卷(期)： 2010, ""(5) 分類號(hào)： 關(guān)鍵詞： SDM11 glyA基因 克隆 表達(dá) SHMT酶【甲醇利用菌SDM11中g(shù)lyA基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達(dá)】相關(guān)文章：
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