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應(yīng)用型生物工程專業(yè)綜合實(shí)驗(yàn)課程實(shí)踐論文

時(shí)間:2023-04-27 05:47:26 生物論文 我要投稿
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應(yīng)用型生物工程專業(yè)綜合實(shí)驗(yàn)課程實(shí)踐論文

  摘要:生物工程綜合實(shí)驗(yàn)是生物工程專業(yè)的一門重要的綜合性實(shí)驗(yàn)課程。根據(jù)學(xué)院實(shí)際情況,構(gòu)建了以米曲霉蛋白酶基因的克隆表達(dá)、發(fā)酵、純化及其應(yīng)用為主線的實(shí)驗(yàn)教學(xué)課程,對該課程的教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)安排、成績評定和教學(xué)效果等進(jìn)行了教學(xué)實(shí)踐,并且取得了較理想的教學(xué)效果,可為同類地方院校應(yīng)用型人才的培養(yǎng)提供參考。

應(yīng)用型生物工程專業(yè)綜合實(shí)驗(yàn)課程實(shí)踐論文

  關(guān)鍵詞:生物工程專業(yè);綜合實(shí)驗(yàn)課程;教學(xué)實(shí)踐

  一、開設(shè)生物工程本科專業(yè)綜合實(shí)驗(yàn)課程的意義

  學(xué)院根據(jù)教育部2012年出版的《普通高等學(xué)校本科專業(yè)目錄和專業(yè)介紹》,以及教育部高等學(xué)校生物科學(xué)與工程教學(xué)指導(dǎo)委員會(huì)的《生物工程專業(yè)規(guī)范》,將基因工程、生物分離工程、酶工程、微生物學(xué)、分子生物學(xué)、發(fā)酵工程和生物工程設(shè)備等課程作為專業(yè)核心課程[3-4]。這些專業(yè)核心課程以理論教學(xué)為主,部分課程也開設(shè)了相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)課。由于生物工程專業(yè)開設(shè)的課程較多,涉及領(lǐng)域較廣,致使核心課程的授課學(xué)時(shí)受到限制,相關(guān)實(shí)驗(yàn)課程以基礎(chǔ)性或者驗(yàn)證性的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容為主,涉及綜合性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目較少[5-6]。實(shí)驗(yàn)課程采用常規(guī)教學(xué)模式,即學(xué)生課前預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)原理、步驟方法等,實(shí)驗(yàn)員將實(shí)驗(yàn)所有藥品和試劑準(zhǔn)備好,授課過程中,學(xué)生按照實(shí)驗(yàn)教材的實(shí)驗(yàn)步驟“照單抓藥”式地完成實(shí)驗(yàn)內(nèi)容[7]。這種教學(xué)模式有利于學(xué)生掌握基本操作技能與方法,突出單一知識點(diǎn),但是調(diào)動(dòng)學(xué)生的積極性和主動(dòng)性較差,不利于學(xué)生對所學(xué)內(nèi)容的全面理解與應(yīng)用,較難將所學(xué)知識全面融會(huì)貫通。為了達(dá)到培養(yǎng)應(yīng)用型人才的培養(yǎng)目標(biāo),根據(jù)學(xué)院目前專業(yè)課程實(shí)驗(yàn)課程的開設(shè)現(xiàn)狀,針對生物工程專業(yè)開設(shè)了“生物工程綜合實(shí)驗(yàn)”課程。該課程符合廣東省部分生物工程類企業(yè)對基因工程、生物反應(yīng)器、分離純化等基本的操作技能要求,該課程將多門專業(yè)核心課程的基礎(chǔ)理論和操作技能有機(jī)地融為一體,促進(jìn)了學(xué)生對現(xiàn)代生物技術(shù)技能的理解和掌握,同時(shí)使學(xué)生具有了團(tuán)隊(duì)合作精神,獨(dú)立思考完成實(shí)驗(yàn)的能力,具備初步的科學(xué)研究思維意識和科研能力。

  二、米曲霉蛋白酶基因的克隆表達(dá)、發(fā)酵、純化及其應(yīng)用的綜合實(shí)驗(yàn)課程設(shè)計(jì)模式

  綜合性實(shí)驗(yàn)是將基礎(chǔ)理論知識點(diǎn)與實(shí)驗(yàn)操作基本技能進(jìn)行有機(jī)的結(jié)合,由多個(gè)具有內(nèi)在關(guān)聯(lián)的小實(shí)驗(yàn)組成,學(xué)生在實(shí)驗(yàn)過程中必須認(rèn)真做好每個(gè)小實(shí)驗(yàn),然后將所有小實(shí)驗(yàn)結(jié)果有機(jī)串聯(lián)在一起,達(dá)到生產(chǎn)出具體產(chǎn)品或者解決具體問題的目的[8-9]。為了讓生物工程綜合實(shí)驗(yàn)課程達(dá)到人才培養(yǎng)目標(biāo),盡量做到將專業(yè)核心課程的基本理論和基本操作技能有機(jī)融合,因此,選取了米曲霉蛋白酶基因的克隆表達(dá)、發(fā)酵、純化及其應(yīng)用作為綜合實(shí)驗(yàn)的教學(xué)內(nèi)容。由于蛋白酶是一類非常重要的工業(yè)用酶,占有全世界工業(yè)用酶至少60%以上份額,堿性蛋白酶又占總蛋白酶的一半以上,被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、化工和皮革等行業(yè);而當(dāng)前商品化的堿性蛋白酶主要來源于細(xì)菌,來源于真菌的較少,從真菌中開發(fā)蛋白酶也就引起了國內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注。米曲霉是我國傳統(tǒng)發(fā)酵食品中重要微生物菌種,該菌產(chǎn)生的蛋白酶對大豆蛋白具有較強(qiáng)的水解作用,對大豆水解物中脫苦味和獨(dú)特風(fēng)味具有非常重要的作用[10]。

 。ㄒ唬┥镄畔W(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)K

  生物信息學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)K主要由表1中2.1的“米曲霉堿性蛋白酶基因的序列分析及表達(dá)引物的設(shè)計(jì)”實(shí)驗(yàn)內(nèi)容組成,該實(shí)驗(yàn)要求學(xué)生利用BioEdit7.0序列軟件查看米曲霉堿性蛋白酶的基因序列及其編碼的氨基酸序列,利用GenBank數(shù)據(jù)庫的Blast程序?qū)Φ鞍酌富虻男蛄蟹治,預(yù)測其信號肽、前導(dǎo)肽和成熟肽序列,利用Oligo7.0軟件對表達(dá)引物的設(shè)計(jì),學(xué)會(huì)在引物上添加限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)及保護(hù)堿基,以便在下一步實(shí)驗(yàn)中獲得的PCR產(chǎn)物并順利酶切。

  (二)基因工程實(shí)驗(yàn)?zāi)K

  基因工程實(shí)驗(yàn)?zāi)K是整個(gè)綜合實(shí)驗(yàn)的重要組成部分,主要由實(shí)驗(yàn)2、實(shí)驗(yàn)3和實(shí)驗(yàn)4的內(nèi)容組成,該部分主要是對目的基因的PCR擴(kuò)增、純化和酶切,然后將目的基因連接至提取出的質(zhì)粒上,獲得重組表達(dá)載體,通過電轉(zhuǎn)化將該載體整合到畢赤酵母基因組上,對畢赤酵母轉(zhuǎn)化子基因組的提取,采用基因組PCR技術(shù)鑒定目的基因整合結(jié)果,通過一系列的基因工程實(shí)驗(yàn)技術(shù),讓學(xué)生加深對基因工程基本理論的理解,以及對基因工程常規(guī)操作技術(shù)具有熟練的掌握。

 。ㄈ┌l(fā)酵工程實(shí)驗(yàn)?zāi)K

  發(fā)酵工程實(shí)驗(yàn)?zāi)K主要是由實(shí)驗(yàn)5組成,利用基因工程實(shí)驗(yàn)?zāi)K構(gòu)建的工程菌株,分別在三角瓶和發(fā)酵罐中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)。在三角瓶中發(fā)酵采用500mL三角瓶裝液量為100mL;而在發(fā)酵罐中,采用逐步擴(kuò)大培養(yǎng)方式,即用多個(gè)500mL三角瓶活化菌株后,接種到10L發(fā)酵罐中擴(kuò)大培養(yǎng),再接種至100L發(fā)酵罐中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)?zāi)K讓學(xué)生認(rèn)識到,采用不同的生物反應(yīng)器培養(yǎng),菌株的生長、產(chǎn)酶能力等都具有顯著的差異,通過理解發(fā)酵曲線(pH曲線、溶氧曲線、溫度曲線、補(bǔ)料曲線和攪拌速率曲線等)來判斷發(fā)酵罐中菌體的生長情況。

 。ㄋ模┥锓蛛x工程實(shí)驗(yàn)?zāi)K

  生物分離工程實(shí)驗(yàn)?zāi)K主要由實(shí)驗(yàn)6和實(shí)驗(yàn)8組成。本實(shí)驗(yàn)?zāi)K利用板框過濾技術(shù)或離心技術(shù)將菌體與發(fā)酵液進(jìn)行分離,對發(fā)酵液中的重組蛋白酶采用膜分離技術(shù)進(jìn)行濃縮,對濃縮后的發(fā)酵液采用硫酸銨鹽析、溶解透析獲得粗酶液。對大豆肽飲料采取等電點(diǎn)沉淀法去除未溶解的大豆分離蛋白,采用膜分離技術(shù)對其濃縮,提高大豆肽飲料中活性肽的含量。通過該實(shí)驗(yàn)?zāi)K讓學(xué)生理解生物產(chǎn)品分離中發(fā)酵液的預(yù)處理、沉淀分離、膜分離、生物產(chǎn)品的濃縮等原理及基本技能。

 。ㄎ澹┟腹こ虒(shí)驗(yàn)?zāi)K

  酶工程實(shí)驗(yàn)?zāi)K由實(shí)驗(yàn)7和實(shí)驗(yàn)8組成。該實(shí)驗(yàn)?zāi)K使學(xué)生認(rèn)識到采用基因工程技術(shù)和發(fā)酵技術(shù)獲得蛋白酶,是目前制備酶制劑的重要方式之一。通過對重組酶的基本酶學(xué)性質(zhì)的測定,獲得的最適合溫度、最適合pH等實(shí)驗(yàn)結(jié)果,指導(dǎo)對大豆分離蛋白的水解,并制備出活性肽飲料。讓學(xué)生從實(shí)驗(yàn)中理解酶學(xué)性質(zhì)測定的重要性,以及了解蛋白酶在實(shí)際生產(chǎn)中的應(yīng)用。

  三、綜合實(shí)驗(yàn)課程的教學(xué)實(shí)踐

  (一)課程安排

  開設(shè)綜合實(shí)驗(yàn)課程要求學(xué)生已完成微生物學(xué)、分子生物、生物化學(xué)、生物工程設(shè)備、基因工程等課程的學(xué)習(xí),因此,該課程安排在大學(xué)三年級的第二學(xué)期,采用集中授課的方式,共計(jì)80學(xué)時(shí),全天候進(jìn)行實(shí)驗(yàn),以確保實(shí)驗(yàn)的連貫性和完整性。

 。ǘ⿲(shí)驗(yàn)分組情況

  在實(shí)驗(yàn)課程中,常常由于學(xué)生分工不明確,試劑、藥品和設(shè)備等數(shù)量的不足導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)課程嘈雜、教學(xué)秩序混亂,因此,本課程將3~4名學(xué)生分為一個(gè)小組,將常規(guī)的設(shè)備、試劑和藥品(如移液槍、三角瓶、燒杯、瓊脂粉等)分配到每個(gè)小組,由小組支配使用管理,直到本課程實(shí)驗(yàn)全部完成后再歸還實(shí)驗(yàn)室。

 。ㄈ┱n堂的組織教學(xué)

  本課程采用學(xué)院的自編教材《生物工程綜合大實(shí)驗(yàn)》,要求學(xué)生課前認(rèn)真預(yù)習(xí),理解實(shí)驗(yàn)原理、操作步驟、注意事項(xiàng)等各個(gè)方面。每次實(shí)驗(yàn)之前,任課教師對本次實(shí)驗(yàn)的小實(shí)驗(yàn)組成、實(shí)驗(yàn)原理、小實(shí)驗(yàn)間的關(guān)聯(lián),可能會(huì)出現(xiàn)的問題、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的預(yù)測等方面均要向?qū)W生詳細(xì)講授,使學(xué)生理解本次實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。學(xué)生根據(jù)自己對實(shí)驗(yàn)教材的預(yù)習(xí)情況,結(jié)合教師對實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的講授,小組內(nèi)學(xué)生之間相互討論,形成本小組的具體實(shí)驗(yàn)方案后,才能動(dòng)手做實(shí)驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)過程中,學(xué)生是實(shí)驗(yàn)操作的主體,要求學(xué)生必須全程參與所有的實(shí)驗(yàn)操作,即每個(gè)實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)都由學(xué)生自己完成,如培養(yǎng)基的制備、各種試劑溶液的配制等。指導(dǎo)教師主要是指導(dǎo)和監(jiān)督學(xué)生動(dòng)手操作,及時(shí)糾正學(xué)生的錯(cuò)誤操作,對學(xué)生每一階段的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行總結(jié)與分析,針對實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的異常數(shù)據(jù)和現(xiàn)象要進(jìn)行重點(diǎn)講解分析,這對擴(kuò)展學(xué)生知識、提高學(xué)生解決實(shí)際問題,加深對基本理論知識的理解具有巨大的幫助作用。

 。ㄋ模┛己朔椒

  實(shí)驗(yàn)成績是衡量評定學(xué)生學(xué)習(xí)情況的根本依據(jù),合理的成績評定方式,對提高學(xué)生對課程的重視程度,增強(qiáng)學(xué)生的積極性和主動(dòng)性,提高學(xué)生的動(dòng)手操作技能具有重要的作用[11-12]。本課程的成績評定主要是由3部分組成(考勤和團(tuán)隊(duì)協(xié)作占10%、實(shí)驗(yàn)操作動(dòng)手能力占20%、實(shí)驗(yàn)報(bào)告占70%)!翱记诤蛨F(tuán)隊(duì)協(xié)作”部分由小組長牽頭,以及組員間相互監(jiān)督來評定組員的分?jǐn)?shù)!皩(shí)驗(yàn)操作動(dòng)手能力”由指導(dǎo)教師根據(jù)學(xué)生在整個(gè)實(shí)驗(yàn)課程中的動(dòng)手操作能力評定分?jǐn)?shù)!皩(shí)驗(yàn)報(bào)告”部分由實(shí)驗(yàn)報(bào)告的格式、科學(xué)術(shù)語表述、語句通順情況、實(shí)驗(yàn)結(jié)果以及對結(jié)果的分析等組成,實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式參照學(xué)校學(xué)報(bào)論文的撰寫格式,讓學(xué)生初步掌握論文的寫作規(guī)范,實(shí)驗(yàn)結(jié)果中的表格、圖片等均要求提供原始數(shù)據(jù)和圖片,對實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)異,F(xiàn)象必須要有合理的解釋和說明。

  四、結(jié)語

  本綜合實(shí)驗(yàn)課程是基于學(xué)院科研課題的基礎(chǔ)上形成的教學(xué)性實(shí)驗(yàn)課程,與學(xué)校人才培養(yǎng)的理念和目標(biāo)一致,對應(yīng)用型人才的動(dòng)手操作技能,同時(shí)對學(xué)生的科研思維和科研素質(zhì)等的培養(yǎng)具有重要的作用。該綜合實(shí)驗(yàn)課程已在兩屆學(xué)生(2013級和2014級)進(jìn)行了開設(shè),得到了學(xué)生的一致好評。由于該課程的每個(gè)實(shí)驗(yàn)之間是相互關(guān)聯(lián)的,上一個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是下一個(gè)實(shí)驗(yàn)的材料,這就要求學(xué)生必須重視每一操作步驟和過程,如果出現(xiàn)錯(cuò)誤,就必須重做,這就要求學(xué)生具備高度的責(zé)任心,每次實(shí)驗(yàn)操作要認(rèn)真負(fù)責(zé)確保成功,無形中提高學(xué)生的動(dòng)手能力和操作技能;整個(gè)實(shí)驗(yàn)是一個(gè)連續(xù)性的過程,實(shí)驗(yàn)時(shí)間的安排與菌體生長、酶的反應(yīng)時(shí)間、實(shí)驗(yàn)室的學(xué)生人數(shù)等客觀因素相關(guān),這就要求學(xué)生會(huì)合理規(guī)劃和安排實(shí)驗(yàn)時(shí)間。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中由學(xué)生自己動(dòng)手操作、思考解決問題,讓學(xué)生加深了對理論知識的認(rèn)識、理解和運(yùn)用。據(jù)兩屆學(xué)生的反饋,該實(shí)驗(yàn)課程的開設(shè)對求職或者考研的學(xué)生在面試、學(xué)習(xí)或工作中都具有極大的幫助。但是本課程才開設(shè)兩年,課程中還有較多不足的地方需要進(jìn)一步的完善;同時(shí)隨著實(shí)驗(yàn)室硬件設(shè)備的進(jìn)一步改善,培養(yǎng)的學(xué)生將更符合當(dāng)今時(shí)代對生物工程專業(yè)人才的需求。

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