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pfl-act基因在大腸桿菌中的高效表達(dá)及其純化
丙酮酸甲酸裂解酶是腸道細(xì)菌在厭氧代謝中十分關(guān)鍵的酶,丙酮酸甲酸裂解酶激活因子(pyruvate formate lyase activator,PFL-A)在功能上具有重要的作用.為進(jìn)一步研究PFL-A的激活機(jī)理,以大腸桿菌K-12的基因組為模板,通過(guò)GenBank上公布的序列設(shè)計(jì)引物,擴(kuò)增出目的基因,克隆到pMD18-T載體,經(jīng)測(cè)序,所擴(kuò)增出的基因與pfl-act基因具有99%的同源性.將pfl-act連接到高效表達(dá)載體pET-22b(+)中,經(jīng)異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo),結(jié)果發(fā)現(xiàn),pfl-act以包涵體形式表達(dá).改變誘導(dǎo)劑、誘導(dǎo)劑量或培養(yǎng)溫度,對(duì)包涵體的形成均沒(méi)有明顯的影響.
作 者： 楊登峰 韋宇拓 黃志明 周興 黃日波 YANG Deng-feng WEI Yu-tuo HUANG Zhi-ming ZHOU Xing HUANG Ri-bo 作者單位： 楊登峰,黃志明,周興,YANG Deng-feng,HUANG Zhi-ming,ZHOU Xing(廣西科學(xué)院,廣西,南寧,530003)韋宇拓,黃日波,WEI Yu-tuo,HUANG Ri-bo(廣西大學(xué),生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,廣西,南寧,530005;廣西亞熱帶生物資源保護(hù)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣西,南寧,530005)
刊 名： 廣西農(nóng)業(yè)生物科學(xué) ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF GUANGXI AGRICULTURAL AND BIOLOGICAL SCIENCE 年，卷(期)： 2006 25(4) 分類(lèi)號(hào)： Q782 關(guān)鍵詞： 丙酮酸甲酸裂解酶激活因子 包涵體 高效表達(dá)【pfl-act基因在大腸桿菌中的高效表達(dá)及其純化】相關(guān)文章：
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