成體狗骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離和體外培養(yǎng)的初步研究

目的 探索成體狗骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)的分離、體外培養(yǎng),為其將來應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).方法 無菌條件下抽取狗肋骨骨髓,Ficoll分離液(密度1.077g/ml)梯度離心分離單個(gè)核細(xì)胞,在含10%新生牛血清的DMEM中,37℃、5%CO2、飽和濕度下常規(guī)培養(yǎng),取貼壁細(xì)胞并進(jìn)行傳代,觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)形態(tài).結(jié)果 取得較高純度的成體狗骨髓MSCs,并保持細(xì)胞的活性;成體狗骨髓MSCs在體外培養(yǎng)中,為貼壁生長(zhǎng)的單個(gè)核球形細(xì)胞,培養(yǎng)3～4d后開始大量增殖,為紡錘形和星形多突起的細(xì)胞貼壁生長(zhǎng),6～8d細(xì)胞達(dá)到70%～90%融合.傳代細(xì)胞3～4d即可再次傳代.結(jié)論 采用Ficoll分離液進(jìn)行梯度離心分離,可獲較高純度的MSCs,是實(shí)用、便捷和可行的方法 ;而且在體外培養(yǎng)的條件下能大量增殖,形成形態(tài)均一的細(xì)胞集落,可以成為進(jìn)一步進(jìn)行細(xì)胞擴(kuò)增或其它實(shí)際應(yīng)用的基礎(chǔ).

作 者： 雷開鍵 杜一平 姜雄 熊永祥 賈鈺銘 宋玉光 林萍 羅華   作者單位： 宜賓市第二人民醫(yī)院腫瘤科,四川,宜賓,644000  刊 名： 四川醫(yī)學(xué)  ISTIC 英文刊名： SICHUAN MEDICAL JOURNAL  年，卷(期)： 2007 28(10)  分類號(hào)： Q813.1  關(guān)鍵詞： 間充質(zhì)干細(xì)胞   細(xì)胞培養(yǎng)   體外   骨髓   狗  

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