晚期氧化蛋白產(chǎn)物的分離純化和鑒定

目的分離純化以人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)為原料生成的晚期氧化蛋白產(chǎn)物(advanced oxidation protein products,AOPP),即AOPP-HSA,并對其進行鑒定,以尋求一種制備高純度且具生物活性的AOPP-HSA的方法.方法采用HSA-HOCl孵育法體外制備AOPP-HSA粗純品,經(jīng)凝膠層析和離子交換高壓液相層析(high performance liquid chromatography,HPLC)兩步層析分離純化其中的AOPP-HSA,并經(jīng)紫外和熒光光譜、SDS-PAGE、單核細(xì)胞TNF-α分泌實驗鑒定其結(jié)構(gòu)特征和生物學(xué)活性.結(jié)果分離的蛋白質(zhì)純度達99.4%,分子質(zhì)量為700×103,是含有雙酪氨酸的蛋白交聯(lián)聚合物,能夠顯著刺激單核細(xì)胞TNF-α的分泌.結(jié)論采用上述兩步層析方法能夠由粗純品中成功分離出高純度并具生物活性的AOPP-HSA,為AOPP的進一步研究奠定了基礎(chǔ).

作 者： 孫巖 吳雄飛 金錫御 SUN Yan WU Xiong-fei JIN Xi-yu   作者單位： 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院腎科,重慶,400038  刊 名： 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE  年，卷(期)： 2006 28(10)  分類號： Q503 Q51 Q591.2  關(guān)鍵詞： 晚期氧化蛋白產(chǎn)物   尿毒癥毒素   色譜法   凝膠   離子交換   單核細(xì)胞  

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