嗜鉻顆粒蛋白A基因的反義轉基因小鼠模型的建立及該基因啟動子的組織特異性

構建小鼠嗜鉻顆粒蛋白A（Chromogranin A，CGA）基因的反義DNA載體pGAS1C-lacZ。用電穿孔的方法將該載體轉化大鼠腎上腺髓質(zhì)細胞瘤細胞系PC-12，X-Gal染色后證明位于CGA基因啟動子下游的報告基因lacZ已經(jīng)表達。用限制性內(nèi)切酶除去載體的質(zhì)粒骨架后，顯微注射入供體昆明小鼠的受精卵中，隨后將注射過DNA的受精卵移植入假母的輸卵管中，完成正常的胚胎發(fā)育。用PCR的方法篩選假母產(chǎn)下的小鼠，得到CGA基因反義RNA轉基因首建鼠14只。將首建鼠分別與正常昆明鼠交配，產(chǎn)生后代。取首建鼠的腎上腺進行X-Gal染色，組織用于石蠟切片，根據(jù)各鼠腎上腺切片的藍色深淺判定轉入基因表達量的高低，篩選到兩只表達量高的首建鼠，留下它們的后代。取轉基因鼠的各種組織用于X-Gal染色，發(fā)現(xiàn)報告基因在腎上腺、胰腺的胰島中有表達，而在肌肉、脂肪組織中無表達，說明CGA基因的啟動子具有神經(jīng)內(nèi)分泌組織特異性。

作 者： 孫紫清 吳鶴齡 SUN Zi-Qing WU He-Ling   作者單位： 北京大學生命科學學院,  刊 名： 遺傳學報  ISTIC SCI PKU 英文刊名： ACTA CENETICA SINICA  年，卷(期)： 2001 28(5)  分類號： Q754  關鍵詞： 嗜鉻顆粒蛋白A基因   反義RNA  

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