人lrp-cDNA全長編碼區(qū)的克隆及其在大腸桿菌中的表達

目的:擴增人lrp-cDNA全長編碼區(qū)、并在大腸桿菌中表達和鑒定.方法:提取脂多糖刺激后HEK293細胞的總RNA,通過RT-PCR的方法擴增出全長人lrp序列,將其克隆入原核表達載體pcTAT后轉化大腸桿菌誘導表達,做SDS-PAGE分析;并用免疫印跡法鑒定6His-TAT-LRG融合蛋白表達.結果:測序結果表明,獲得了全長人lrp-cDNA全長編碼區(qū),其序列與GenBank已經公布的不完全一致;SDS-PAGE分析表明,6His-TAT-Lrp融合蛋白在大腸桿菌中成功表達,表達量約占菌體總蛋白的17%;免疫印跡法鑒定顯示,該融合蛋白可與相應抗血清產生陽性反應.結論:得到人lrp-cDNA全長編碼區(qū)序列,并成功表達,為人lrp功能的深入研究奠定了基礎.

作 者： 宋慶賀 柴玉波 陳蘇民 陳南春 黃勇 代忠明 SONG Qing-He CHAI Yu-Bo CHEN Su-Min CHEN Nan-Chun HUANG Yong DAI Zhong-Ming   作者單位： 第四軍醫(yī)大學基礎部生物化學與分子生物學教研室,陜西,西安,710033  刊 名： 第四軍醫(yī)大學學報  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY  年，卷(期)： 2006 27(5)  分類號： Q78  關鍵詞： 脂多糖   應答基因   逆轉錄聚合酶鏈反應   基因表達  

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